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免疫扫描电动显微镜的标记物有些甚么请求
    由于高分辩扫描电镜的问世,为用外表标记手艺察看细胞外表外形和区分两类细胞群与其外表外形相接洽的机能供给了前提.用此手艺方式可研讨细胞外表杭原、受体的性子,散布及活动.在准绳上,透射电镜与荧鲜明微镜用的免疫标记手艺也合用于免疫扫描电子显微术。但由于扫描电镜与透射电镜的成像道理差别,因此对免疫扫描电镜术的标记物有些特别请求。这些请求是:
    1.清楚、轻易辨认的外形:对透射电镜的标记物请求电子致密度高。电动显微镜的标记物电子密度不是主要间题,而外形是辨认的主要身分。
    2.巨细适合:普通而言,扫描电镜分辩率低于透射电镜,另外扫描电镜标本要金属镀膜,这都影响样品外表布局的分辩。因此标记物若太小、布局过于徽细,就不能与样品外表固有布局区分。但标记物过于大,又不能明白定出外表抗原地位,因此奥林巴斯显微镜的标记物巨细要统筹以上两方面。
    3.化学性子不变。生物显微镜在标本处置进程中不会被破坏.另外在样品制备进程中能安稳地连系。
    4.对细胞外表的固有亲协力差。
    合适以上前提的较经常利用的外表标记物有野生分解的非生物资料(胶乳顺粒,硅酸聚合物等),生物大份子(铁卵白,血蓝卵白等),病毒(TMV),噬菌体和胶体金顺粒等。
    胶乳颖粒有聚苯乙烯和丙烯两种。聚苯乙烯类籁粒外表疏水,易产生自堆积。但与抗体以恰当比例夹杂时,不需偶联便能很好地与抗体附着.丙烯类颗粒外表有OH基,自觉堆积少.标记时可操纵OH基停止偶联。
    尼康显微镜所察看样品硅酸聚合物颖粒为球形。利用时先插手7-氨基三乙氧基丙硅烷{Y-amino-triethoxy propylsilane)使顺粒外表带一NH,,而后再与抗体偶联。
    TMV长300nm,宽16nm‘颀长杆状布局。扫描电镜下辨认性好.能与】茄安稳地连系,构成TMV-IgG复合物。若是红细胞外表附有一般免IgG,TMV便能使这类红细胞充满杆状物。由于该病毒太长使分辩率降落,也有尝试室将其截短利用。
    经常利用的咙菌体是T,噬菌体(以大肠杆菌为宿主)自始自终,形如端抖。在扫描电镜下辨认机能好.但体积较大,<DX174也因此大肠杆菌为宿主的噬菌体,呈二十面体.由于体积较小,孺用高倍察看.
    若是利用电动显微镜,金标记是抱负的。铁卵白固然有高电子密度,但份子究竟结果太小,因此利用无限。
    对于抗体的纯化与透射电镜所用的有关方式不异。抗体与标记物的偶联也不在此赘述。本文来历http://abatasya.net

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